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    平菇的孢子分离与菌种复壮技术

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        一般情况下,同一平菇品种经过4年以上的栽培就会或多或少的表现出一些退化的现象。诸如出菇迟、长势弱、转潮慢、产量不高等等。通过对平菇进行有性繁殖是解决种性退化的一条有效途径。由于平菇子实体孢子弹射量较多,接种操作相对简易,在栽培户中推广孢子分离提纯复壮技术是可行的。

        母种孢子分离与接种

        1、采菇

        选择菇体形态好、生长势健壮、能代表该品种性状接近成熟的平菇子实体,采摘一丛或两丛作为分离复壮用种菇拿回室内备用。要求所采的子实体菌盖边缘稍卷或已接近平展(编者注:一般来说组织分离的子实体在7、8成成熟即可;而孢子分离的要成熟一点,否则无法弹射孢子)。

        2、装置与灭菌

        用0.2%新洁尔灭清洗干净3个1000毫升烧杯和3个培养皿,烘干水分后将培养皿放入烧杯底部。切取菌盖长达7-9厘米上层或中层的一朵平菇子实体,用药棉蘸75%酒精轻擦菌盖和菌柄后,将菌褶朝下放入烧杯中的培养皿中如有插菇钢丝架更好。此操作完成后在烧杯口沿上盖好用无菌水滴湿的4层沙布,上面再盖一层白纸,用皮筋扎口,以次类推连同3个同样处理的烧杯一起放入接种箱。接种箱中另放入30-40支PDA试管培养基,接种铲、镊子酒精灯等工具,用10毫升甲醛加6克高锰酸钾混合后对接种箱进行熏蒸消毒灭菌。

        3、接种与培养

        放入接种箱用于孢子分离的平菇,经过8-12小时后就有孢子弹出,一般放置一昼夜培养皿中就有厚厚一层白色孢子印,这时要及时进行接种。接种时双手用75%酒精擦洗后就可进行。先取掉烧杯口上覆盖的纸和纱布,再用镊子夹出平菇体,取出培养皿用左手食指和母指夹住皿体,再取一支试管培养基用左手小指和无名指夹住。右手持接种铲竖着在酒精灯上灼烧进行干热灭菌,待冷却后用右手小指及鱼际拔出试管棉塞,用接种铲从培养皿中央铲取一些孢子接在试管培养基中央,随即塞上棉塞即可。一朵菇体弹射的孢子量可接种10支以上试管种。接种完成后贴上标签放入25℃左右的恒温箱中培养。培养过程中,前3-4天为孢子定植期,外表看不出任何变化,一周以后孢子开始萌发并在四周长出白色绒毛状菌丝体,16-18天左右菌丝布满培养基面,即得纯菌丝母种。如有污染管应及时弃除。

        原种扩接

        选取10支菌丝洁白、粗壮、生长整齐的试管种进行原种的扩接。另20支纯菌丝母种等做完出菇试验后再作留种及相关处理。一支试管种可接5瓶原种,每支试管接完要进行火焰干热灭菌后再扩接另一支试管。接种完毕后取出菌种瓶放入25℃左右恒温箱培养,菌丝满瓶后10天左右进行出菇试验。

        出菇试验

        采用常规木屑或棉壳为主的培养基进行袋料栽培。一般接种10-20袋即可。接种后在适宜温度下发菌,菌丝长满后移到出菇最佳条件下进行观察。并选取菌丝生长速度快,吃料能力强、出菇早、朵形好、转潮快、产量高、质量好的平菇菌袋上的子实体再进行组织分离,然后选优作为生产用种。

        为什么还要进行组织分离呢?这是由于孢子分离得到的母种,其中含有没有发生质配的单核菌丝,而单核菌丝是不能结实的,所以孢子分离得到的母种不能直接应用到生产中。

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