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    食用菌液体菌种培养的技术环节

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      液体菌种培养的技术环节

        液体菌种设备最好有这几点功能:有停电防护装置和防止培养液倒流装置。
        现将做液体菌种的几大重要环节介绍如下:
        菌种制作
        液体母种的制作也有较多方法,笔者一般就是用小木屑加其他营养料,用锥形瓶培养。此环节比固体菌种培养要更仔细一些,特别注意细菌的监测,菌种环节一定要把握好。
        培养液灭菌
        此环节要严格按照操作规程,把握好每一步,确保培养液灭菌彻底。期间注意的是,培养液不能加太满,否则放气的时候,液体从放气阀冲出。个人建议在放气阀上再安装一个逆止阀,避免停电。
        接种环节
        接种环节也是很重要的环节,我们一般是将母种先钩出来放到另一个装有蒸馏水的大锥形瓶中,然后再倒入培养罐。各个环节必须有大火保护,否则容易感染。
        培养与监测菌种纯度(最重要环节)
        笔者认为此环节是液体菌种培养的中心环节,也是最重要的环节。培养菌种严格按照操作规程,注意每个细节。
        1、空气过滤器和接入培养罐的硅胶管要一起提前灭菌,建议在空气过滤器和接入培养罐的硅胶管间安装一个逆止阀,防止培养液倒流,这是很关键的,否则培养时因为内外压力差变化,培养液容易回流。
        2、监测菌种纯度。这一步是至关重要的环节,此步骤将直接决定你的成败,监测不好可能会导致全军覆没。监测菌种纯度有以下几种方法:
        ①看:看培养液是否透明澄清,菌球是否均匀。培养液不能浑浊。用试管或锥形瓶,从下面接出少量液体(注意,一定要在大火焰的保护下进行),观察菌球是否悬浮,不能在短时间内下沉或上浮。
        ②闻:闻放气阀处是否有菌丝的纯香,不能是其他酒精味、酸味甚至恶臭,要回辨别霉菌和细菌感染时不同的气味。
        ③显微镜观察:显微镜观察一些霉菌的特征,平时可以将已经确定的液体菌拿来观察练习,借助一些教材,对比观察,这是经验累积才能确定的,但也是必不可少的。显微镜具体使用方法本网站有介绍。
        ④培养监测:这一步是最简单也是最直观的,直接反应了该菌种是否纯净。具体操作如下:提前做好试管或锥形瓶琼脂培养基,并提前做好灭菌工作,再用此小锥形瓶或试管,在培养罐的下面放料处,接少量的培养液(这一步两人操作,一个人负责火焰保护,一个人负责接液体),整个过程在火焰的保护下塞上棉塞。倾斜放置,让部分琼脂露出培养液。控制温度,1~2天即可观察,霉菌和细菌都可以尽收眼底,如果有感染,培养罐全体培养液应及时放弃,否则后果很严重。
        接种环节
        首先确保液体菌种纯净且旺盛的前提下,再讨论接种环节。接种也是液体菌种生产较为关键的环节,因为菌种含水量大,操作中很容易感染空气中的杂菌。我把我的接种方法透露一下,希望对您有帮助。接种操作:五人一组,每一组一把接种枪,五个酒精灯。一个人专门负责接种枪的把握注射菌种,其余四人负责打开袋口(菌袋最好用无棉盖封口,便于操作)。每人面前一个酒精灯,酒精灯火焰一定要大,大到可以包围无棉盖口。接种时,在火焰上打开盖口,在火焰上接种,接完后,在火焰上盖上盖口,整个环节要迅速,否则火焰要把菌袋烧坏。接种枪在没有用的时候将整个枪头放在火焰上,避免在空气中放置。整个操作环节保险度极高,对接种室的灭菌要求不高。

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