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    灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究

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      灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究

      许占伍 张引芳 金力 朱爱莲
      (上海浦东天厨菇业有限公司,上海浦东201203)《食用菌》杂志2012.2

        摘要 灰树花为食用菌工厂化生产研究的新品种。对袋栽灰树花后熟期、环境条件等对原基形成的影响研究。结果表明:菌丝发满袋后熟10~15 d,袋壁割口搔菌诱导出菇,菌丝恢复期和现蕾期温度控制为:20~22℃;16~18℃,光照控制为:0 h/24 h,空气相对湿度控制为:97%~99%;89%~91%,通风量控制为:4min/10min;10min/10min,有利于原基的形成。
        关键词 灰树花 工厂化 原基诱出

        灰树花[Grifola frondosa(Dicks,ex Fr)S.F.Gray],又名贝叶多孔菌、千佛菌、栗子蘑、云蕈、莲花菌等,日本称之舞茸。灰树花肉质脆嫩,营养丰富,含有生物活性物质,具有提高人体免疫力和抗肿瘤作用。灰树花人工栽培研究始于日本,上世纪80年代实现了工厂化生产。我国在20世纪80年代初开始对灰树花进行人工驯化栽培,并在河北、浙江省有少量栽培,但主要依靠自然条件,以大棚栽培为主,技术尚不成熟,产量不及日本的2%。在现有的灰树花大棚栽培中普遍存在原基分化能力弱,定位不一致等问题,造成产量较低、品质差,且生产不稳定,无法满足正常的灰树花市场供应需求。
        灰树花较之其他食用菌,存在着适应性差、抗逆、抗杂菌能力弱等不足之处[1],其突出表现在子实体发生时期。食用菌子实体发生是指菌丝在培养基质中经营养生长后,菌丝扭结、原基出现、子实体形成并向生殖生长过渡的生理过程。此生理过程对食用菌的生物学效率有重要的影响,是食用菌研究的主要领域[2]。笔者对灰树花子实体形成关键时期(原基形成期)进行试验研究,摸索出原基形成期最佳环境参数,以期为灰树花工厂化栽培奠定技术基础。

      1 材料与方法

      1.1 菌株 灰天1号,浦东天厨菇业有限公司选育。
      1.2 栽培基质 母种培养基:PDA。液体培养基:天厨菇业灰树花栽培发酵罐配方,按照工厂化液体种操作工艺培育,培养7~8d后接种。
        栽培种培养料:天厨菇业灰树花栽培2号配方,含水量控制在60%~62%,pH自然。
      1.3 栽培要点 按照工厂化栽培培养料搅拌工艺进行拌料,将所得混合基料采用装袋机装入18cm×36cm的聚丙烯袋和20cm×39cm带空气过滤口(以下简称透气仓袋)的聚丙烯袋中(CK),每袋装入湿料1000~1100g,扣好套环,高温灭菌,灭菌时间为混合基料的中心温度达到118~121℃,并保持30min;将灭菌后的混合基料强制冷却至22~25℃后接种,接种量为20~30ml。培养室温度控制在(22±1)℃,室内湿度维持在65%~80%,CO2浓度控制在2500mg/kg以下。菌丝发满袋后备用。
      1.4 试验方法
      1.4.1不同后熟期对原基形成的影响 菌丝发满后,分别后熟培养:0d(CK),10d,15d,20d,30d,在后熟期形成原基的,直接检出出菇,未形成的割口诱导原基,每袋割2个孔。观察后熟期吐黄水污染情况,原基形成和出菇情况。共3次重复,每个处理200袋。
      1.4.2 搔菌对原基形成的影响 对达到后熟期的菌袋,进行割口搔菌诱导原基形成,每袋在侧面割2个口,孔径为1.5cm,搔去表面的菌皮,搔菌深度为0.5cm,透气仓袋的不搔菌,做为对照。放置在原基诱导室进行原基诱出,共3批重复,每批各做200袋。统计原基诱出时间、形成率和后期子实体产量。
      1.4.3 温度对原基形成的影响 原基形成期分为菌丝恢复期和现蕾期[3],温度调控分为割口搔菌后菌丝恢复期温度及现蕾期温度,分别设置以下4个处理:(22~24℃;18~20℃),Ⅱ(20~22℃;18~20℃),Ⅲ(20~22℃;16~18℃),Ⅳ(18~20℃;18~20℃)。统计原基形成时间和原基形成率。试验3次重复,每个处理做200袋。
      1.4.4 不同光照时数对原基形成影响 菌丝培养期,置于22℃避光的培养室发菌培养直到后熟结束,光照调控分为菌丝恢复期光照,和现蕾期光照,光照时数以24h内间歇式光照总时间为准,如24h光照8h,其仪表盘上时间设定为光照20min,间隔10min,分别设置以下5个处理:①(24h/24h),②(12h/24h),③(0h/24h),④(0h/12h),⑤(0h/0h),光源为日光灯,光照强度200lx。试验3次重复,每个处理做200袋。统计原基形成率,观察转色情况。待原基转色后,根据灰树花子实体生长所需光照,重新调整光照时数。
      1.4.5 空气相对湿度对原基形成的影响 菌丝培养期,置于22℃避光的培养室发菌培养直到后熟结束,搔菌后至原基形成期间,空气湿度调控分为菌丝恢复期湿度,和现蕾期湿度,采用工厂化超声波加湿调控系统加湿,设置以下5个处理:a(97%~99%;97%~99%),b(97%~99%;93%~95%),c(97%~99%;89%~91%),d(93%~55%;89%~91%),e(89%~91%;89%~91%)。统计原基形成和污染情况。试验3次重复,每个处理做200袋。
      1.4.6 通风量对原基形成的影响 菌丝培养期,置于22℃避光的培养室发菌培养直到后熟结束,搔菌后放置在生育室,在菌丝恢复前设置进风时间为:4min/10min(进风开4min,停10min),现蕾期分别设置4min/10min,8min/10min,10min/10min,12min/10min,14min/10min五个处理,测定生育室CO2浓度,统计原基形成情况。试验3次重复,每个处理做200袋。

      2 结果与分析

      2.1 不同后熟期对原基形成的影响 表1结果表明:菌丝发满后立即搔菌,原基形成率很低,只有73.2%,且有部分原基无法开片形成子实体,平均单产低,后熟期在15d的,原基形成率达到98%以上,且原基都能够正常开片,单产达260g以上。随着后熟期的延长,原基形成率相对较低,观察发现,这主要是由于后熟期延长,灰树花吐黄水现象增加,后期料面菌丝出现大量细菌和霉菌污染,影响原基形成率和后期产量,因此,灰树花袋栽后熟期控制在10~15d较为适宜。
        表1 培养后熟期对原基形成的影响
      后熟天 吐黄水 污染现象      原基分 平均袋
      数/d  现象            化/% 产量/g
       0   无   无         73.2 152.1
      10  少量  个别细菌污染     95.1 238.6
      15  少量  个别细菌污染     98.6 260.5
      20  较多 较多细菌和少量霉菌污染 94.7 250.1
      30   多 大量细菌和霉菌污染   90.3 219.7
      2.2 搔菌对原基形成的影响 灰树花菌袋搔菌后,原基诱出室培养9~10d,割口处原基形成,原基形成率达98.3%,正常每袋两个搔菌孔都可以形成原基,袋产量平均达273.1g,明显高于带透气仓不搔菌的187.3g,且诱出时间一致,子实体菇形整齐;而不搔菌的原基形成时间波动较大,后期容易产生代谢黄水,影响原基形成率,且菇形不整齐。因此,搔菌诱出原基,更适合工厂化生产。
        表2 搔菌对原基形成的影响
      处理  诱出原基时间/d 形成率/% 袋产量/g
      搔菌  9~10     98.3   273.1
      不搔菌 4~15     67.5   187.3
      2.3 温度对原基形成的影响 由图1可见,处理Ⅲ(20~22℃;16~18℃)原基形成率最高,达到97%,处理Ⅰ(22~24℃;18~20℃)原基形成率不到40%,搔菌初期温度偏高,菌丝恢复较快,但现蕾期不易形成原基,且气生菌丝较多;温度偏低菌丝恢复慢,原基诱出期长,易导致后期霉菌污染。

      灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究
      图1 温度对原基形成的影响

      2.4 不同光照时数对原基形成影响 由图2可见,菌丝恢复阶段进行光照,影响菌丝恢复和原基形成,而菌丝恢复后,增加光照有利原基的形成,如0h/24h,原基形成率达到98%,且转色快,抗杂菌污染能力强;如果现蕾期光照不足,原基转色慢,形成率降低,同时光照不足也影响后期产量和品质。

      灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究
      图2 不同光照时数对原基形成的影响

      2.5 空气相对湿度对原基形成的影响 图3所示,处理c(97%~99%;89%~91%),原基形成率达98.3%,菌丝恢复期湿度接近饱和,可控制搔菌料面污染,但前提是料面不能有积水;而现蕾期,需控制湿度,以89%~91%最佳。通过控制两个阶段的湿度差,可明显提高原基形成率。而随着两个阶段的湿度同时降低,其突出表现是料面偏干,易导致原基形成前料面霉菌污染,原基形成受到影响。

      灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究
      图3 空气相对湿度对原基形成的影响

      2.6 通风量对原基形成的影响 通气量达10min/10min时,灰树花原基形成率最高,测定其CO2浓度为1060mg/kg,而加大通气量,原基形成率有降低趋势(图4)。
        灰树花是需氧最多的食用菌之一,通气不足或CO2浓度过高,菌丝生长细弱,分枝少,原基分化困难,开片难,畸形多,但通风过大,易出现栽培室湿度降低或不均,因此管理中要注意通风和保湿两者的矛盾[4]。

      灰树花工厂化袋栽原基形成条件研究

      图4 通风量对原基形成的影响

      3 小结与讨论

        试验研究了工厂化袋栽灰树花培养期不同后熟期,搔菌刺激诱导出菇,搔菌后温度、湿度、光照和通风条件等因素对原基形成、产量等的影响。结果表明:菌丝发满袋后熟10~15d,袋壁割口搔菌诱导出菇,菌丝恢复期和现蕾期温度控制为:20~22℃;16~18℃,光照控制为:0h/24h,空气相对湿度控制为:97%~99%;89%~91%,通风量控制为:4min/10min;10min/10min,有利于原基的形成,这为灰树花工厂化袋栽奠定了基础。

      参考文献

      [1]郭家瑞,王卫国,李磊,等.灰树花研究概述[J]食用菌,2010(4):1-2.
      [2]郑永标,陈济琛,林新坚.食用菌子实体发生研究进展[J].食用菌学报,2003,10(1):59-63.[3]潘辉,李正鹏,王瑞娟,等.灰树花子实体发育过程研究[J].食用菌,2010(5):9-11.
      [4]房玉洁,王冬梅,史秀娟.灰树花的生物学特性及高产栽培技术[J].中国果菜,2004(2):18-20.

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